髂股动脉粥样硬化闭塞症家兔模型
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1.家兔ASO动物模型的制作
要制作家兔ASO动物模型,需要使用动物、药物和器械。动物选用体重介于2.5-3.5kg的雄性新西兰家兔,药物选用高脂、高胆固醇饲料,每天胆固醇摄入量为1g,以及10%乌拉坦和牛血清清蛋白。而在器械方面,则需要4F气囊导管。
2.造模方法
在制作家兔ASO动物模型的过程中,实验组每只家兔都会被给予高脂、高胆固醇饲料,而对照组则会被喂食普通饲料。造模的第3天,20只家兔在10%乌拉坦麻醉下,由左侧股动脉插管,使用4F气囊导管拖拉右侧髂股动脉8次,以制造机械性内膜损伤,同时进行动脉造影。第7天,实验组静脉注射牛血清清蛋白250mg/kg,而对照组则注射等体积生理盐水。
3.造模原理
制作家兔ASO动物模型所依据的原理,是利用4F气囊导管拖拉损伤髂股动脉内膜,通过综合因素如高胆固醇、高脂和免疫损伤等,成功地制作了家兔ASO动物模型。
4.造模后一般变化
经过造模后,实验组的家兔普遍出现右后肢跛行,且于14-18周时较为明显,其中3只家兔还出现了右足趾坏死。而通过股动脉造影检查可以发现,实验组的股动脉壁出现了粗糙、虫蚀样的情况,且狭窄明显,远端血管显影不佳,侧支循环较少。对照组则没有出现明显的变化。
5.造模后生化变化
在造模前后的生化指标方面,家兔血脂、血胆固醇、血浆内皮素(endothelin, ET)、血浆NO的量分别为(0.89±0.09)mmol/L,(0.99±0.15)mmol/L,(99.13±16.51)mmol/L,(6.26±0.80)mmol/L;而造模后则分别变为(8.95±1.68)mmol/L,(8.38±11.08)mmol/L,(5.81±3.62)mmol/L,(2.33±0.55)mmol/L。而对照组的家兔血脂、血胆固醇、血浆ET、血浆NO则分别为(0.89±0.16)mmol/L,(1.01±0.21)mmol/L,(107.24±24.82)mmol/L,(6.93±0.72) mmol/L。由此可见,制作家兔ASO动物模型后,家兔血脂、血胆固醇及血浆ET明显上升,而血浆NO明显下降。
6.造模后病理变化
通过病理学的观察,可以看到实验组的家兔出现了动脉粥样斑块,分布于主动脉、髂股动脉和肾动脉,其中右髂股动脉最为明显,管腔极度狭窄。在光学显微镜下,动脉壁呈现增厚和松散,管腔明显狭窄,部分可见小血栓形成,内皮细胞脱落、破坏,内膜增厚,中膜平滑肌增生紊乱,泡沫细胞大量形成,斑块内可见部分钙化或大量纤维化。在电子显微镜下,内皮细胞脱落,部分内皮细胞核畸形,染色质趋边,内弹力板消失或破坏,中膜平滑肌紊乱,结缔组织大量增生,穿过弹力板到内皮下或接近管腔,泡沫细胞明显增多。而在对照组中,光镜和电镜检查都没有发现明显的异常结构。
北检院部分仪器展示