使用牛视网膜可溶性抗原免疫后，大鼠可能会发生葡萄膜视网膜炎症反应症状，最长可持续到免疫后第23天。23天后，大部分大鼠可观察到光感受器外段破坏，这表明长时间的炎症反应导致了视网膜的变化。

1. 模型制作方法

在制作该模型时，首先需要使用健康无眼病的Wistar大鼠，体重为150g，并使用牛视网膜可溶性抗原作为免疫剂量。

(1) 牛视网膜可溶性抗原的提取：新鲜的牛视网膜50只，首先进行匀浆、盐析、透析、离心等操作，然后取上清液，使用二乙基胺乙基-琼脂糖凝胶，C柱进行离子交换层析分离纯化S-Ag。

装柱时填充约85ml凝胶，使用pH7.5的含三羟基氨基甲烷的盐酸层析缓冲液，流洗平衡凝胶柱后，加入牛视网膜上清液样品，继续层析缓冲液洗柱(流速50ml/h)至蛋白峰回落基线。使用0-0.4mol/L氯化钠线性洗脱，10个柱体积(100ml/h)，每5ml收集1管(紫外线280nm监测)。S-Ag峰样品在4℃双蒸水透析24小时，移入玻璃瓶中，置-30℃保存。使用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳银染色可显示S-Ag为一主带，相对分子量为52×103。等电聚焦电泳S-Ag条带，等电点为6.2，抗原分析结束后冻干，可在30℃保存。

(2) 大鼠葡萄膜视网膜炎模型的制作：将完全弗氏佐剂与等量牛视网膜S-Ag混匀，制成乳剂，S-Ag终浓度为1.35mg/ml。接下来，需要在大鼠双足底部各注射0.1ml，计270μg/只，前期实验分别使用100μg、200μg、300μg S-Ag免疫大鼠诱发葡萄膜视网膜炎，经比较发现S-Ag 200~300μg 为最佳免疫剂量。同时，每只大鼠尾静脉注射10×10⁹个菌体的灭活百日咳杆菌溶液，腹腔注射0.1ml大肠杆菌超声粉碎离心后的上清液。造模23天后，可以进行检查。

2. 观察指标与分析

进行视网膜病理学检查时，可以发现S-Ag免疫23天后，大部分大鼠均存在光感受器外段破坏的情况。此外，该模型还会引起炎症细胞浸润的种类、数量和部位、组织结构改变和破坏程度的不同。

其中，轻度病例视网膜内界膜增厚，炎症反应性均质样淀粉物质沉积或伴有局部空泡形成；神经节细胞和视网膜内丛状层空泡样变；视网膜色素上皮细胞肿胀、空泡样变性、结构紊乱；虹膜或睫状体充血，脉络膜增厚(类上皮细胞浸润)，偶见炎症细胞浸润(主要为淋巴细胞)。

在中度病例中，可以在上述改变基础上可见虹膜、睫状体或玻璃体腔内少量炎症细胞浸润；内界膜、内丛状层、内核层可见局限性炎症灶(炎症细胞聚集)；脉络膜血管壁增厚，血管炎性反应。

在重度病例中，大鼠常常会出现虹膜、睫状体、脉络膜和视网膜各层组织中炎症细胞浸润数量增多的情况，玻璃体弥漫性炎症细胞渗出；有的眼脉络膜明显呈炎症性增厚，以淋巴细胞浸润为主；眼组织结构也会遭到破坏。

北检院部分仪器展示