【原创文章】

花粉变应原是一种致敏物质，它可以引起人和动物的过敏反应。下面介绍一种利用兔子进行花粉变应原实验的方法。

【操作步骤】

选用健康成年家兔，体重在1.5~2.0千克之间。首先要配制花粉变应原，可以采用昆明地区蒿属花粉55g，脱脂后使其脂肪含量低于3％，按1：20的比例加入Coca's液中(含有0.5%的氯化钠、0.375%碳酸氢钠、0.4%酚等)，并通过过滤、透析、浓缩、灭菌等多个步骤，使其浓度为1.25mg/ml。

将蛋清与花粉变应原混合，分别用75%乙醇消毒鸡蛋壳后提取蛋清，作为蛋清蛋白变应原。然后将两种变应原分别与等量的弗氏完全佐剂混合，分别免疫家兔。第一次免疫时，应在兔后的掌和背部各注射0.5ml的变应原，共计3ml。一周后，再次注射相同的变应原，此时注射部位为兔后腿内侧肌肉和背部4点皮下，同样是0.5ml，共3.0ml。之后每隔一周在相同部位免疫一次，共计3次。

蒿花粉组和蛋清蛋白组分别将浓缩的蒿花粉变应原和蛋清蛋白变应原滴入家兔鼻腔，每天滴鼻1次，每次每侧鼻腔6滴，共2周。第4次免疫后1周，第2组动物耳静脉注射浓缩变应原2.5ml，并在1周后重复注射1次。第1组动物在第4次注射后，第2组动物在第6或7次注射后，使用絮状沉淀法检测血中抗体效价，达到1:400以上被认为是实验动物。

合格动物用相应的变应原滴鼻，每次每侧鼻腔10滴，每天滴鼻1次，共5天。

【结果分析】

在鼻腔内滴入致敏变应原后，第1、2组动物均表现出类似喷嚏的反应。10分钟后，用放大电耳镜检查发现下鼻甲和鼻中隔有明显充血肿胀。0.5小时后，充血肿胀变得更为明显，总鼻道内充满分泌物，前鼻孔下方皮毛全部浸湿。部分动物有白色和无色的鼻涕溢出，但鼻拭纸涂片中未发现嗜酸性粒细胞。少数动物在短时间内表现出烦躁不安、搔抓鼻部和尖叫等行为，持续1～2分钟。不同时段处死动物后，取样发现10分钟、30分钟、3小时的动物整个鼻甲充血肿胀明显，24小时后逐渐恢复正常。第1、2组动物的鼻黏膜组织学改变基本相同。光镜下的观察发现，在变应原激发后10分钟至3小时内，鼻黏膜水肿明显，血管扩张，固有层中多为中性粒细胞的浸润。变应原激发后30分钟，血管周围有少量嗜酸性粒细胞，部分上皮细胞和绒毛脱落。变应原激发后24小时，水肿减轻，固有层中细胞浸润增加，淋巴细胞、中性粒细胞等浸润细胞逐渐增多。在变应原激发后10天时，细胞浸润主要是淋巴细胞，浆细胞数量增多，20天时浆细胞数量进一步增多。

北检院部分仪器展示