(一) 材料与方法

本实验选择携带纯合SLA-DRB新等位基因的近交系WZSP2头为研究对象，由中国农业科学院畜牧研究所试验猪场提供。我们采集了其耳组织样本并进行液氮保存。反转录PCR、克隆、测序等方法被使用于获得SLA-DRB新等位基因cDNA序列。

(二) 结果与分析

(1) RNA完整性：我们在图1-89中展示了RNA的完整性。

(2) RT-PCR扩增产物的特异性鉴定：我们在五指山猪cDNA中利用SLA-DRB引物扩增出一条长度约为810bp左右的特异带，1.5％琼脂糖电泳检测结果见图1-90所示。

(3) PCR扩增产物克隆：我们将回收的扩增产物与pGEM-T Easy Vector连接，将其转化为大肠杆菌DH5a受体菌，并涂布到含有50mg/mL Amp的LB平板上，最终获得了阳性重组质。

(4) 质粒酶切鉴定：我们对重组子DNA使用EcoRⅠ酶进行切割，1.5％琼脂糖凝胶电泳发现，目的基因DNA片段成功插入质粒形成了重组质。结果见图1-91所示。

(5) PCR测序结果：我们使用SP6和T7通用引物对克隆的3'端和5'端进行

北检院部分仪器展示