1 阳离子化牛血清白蛋白法家兔模型

【操作步骤】选用体重为2.5kg左右的雄性大耳白家兔进行实验，普通饲料适应性喂养，并使用尿蛋白定性测试结果阴性的兔进行实验。按照 Border方法，牛血清白蛋白(BSA)用碳化二亚胺改变蛋白质的羧基端，使其等电点(pI)提高到8.6以上，处理后的BSA即为阳离子化BSA(C-BSA)。将其溶液透析冷冻干燥，置于－40℃冰箱保存备用，并在使用前溶于0.15mol/L磷酸盐缓冲液中。然后，每只兔耳静脉注射大肠杆菌内毒素1μg和C-BSA 1mg作为预免疫，预免疫1周后，每日每只兔耳静脉注射C-BSA 25mg正式免疫。对照组则静脉注射等量的生理盐水，并在第8周末结束实验。

【结果分析】实验结果显示，肾小球明显肿胀，球内的细胞数量显著增多，并且肾小球的基底膜(GBM)明显增厚。使用过碘酸六亚甲基四胺银染色法(PASM)、HE和Masson染色后，可以看到GBM钉突形成及上皮下沉积物的现象。大多数动物形成了程度不等的新月体，部分肾小球出现萎缩。在透射电镜观察下，可以看到上皮下大量电子致密物的沉积，GBM显著增厚，上皮细胞足突广泛融合、变平或消失，内皮细胞肿胀。免疫荧光观察显示荧光强度明显增强，IgG沿毛细血管壁呈粗大颗粒状弥漫沉积。

2 阳离子化牛血清白蛋白法小鼠模型

【操作步骤】选用体重为20g左右的纯系BALB/c小鼠，雌雄对半并进行随机分组。预免疫采用弗氏不完全佐剂进行1周，随后每隔一天进行一次子尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA，10mg/ml)，每只注射2mg，共连续注射4周。对照组则全程给予尾静脉注射生理盐水，每只注射0.2ml。实验进行到第3周时，每周各组分别进行两次尿蛋白定性实验，并在第4周末取肾皮质进行免疫荧光、光镜（HE、PASM、Masson、磷钨酸苏木素染色液(PTAH)）和电镜观察。

【结果分析】实验结果显示，用该方法制作的膜性肾小球肾炎模型病变稳定而典型，病理变化较为一致，接近或模拟临床患者实际病变，是一种较理想的肾炎发病机制研究的动物模型。肾功能尿蛋白定性试验显示小鼠自第3周起出现蛋白尿，在实验第4周末处死小鼠取肾时，可以看到肾脏肿大、包膜紧张，呈苍白色。与正常组相比，病理组小鼠肾皮质免疫荧光观察显示IgG沿肾小球毛细血管壁呈颗粒状沉积。而在病理组小鼠的肾皮质石蜡切片HE染色、PASM、Masson、PTAH特殊染色后，可以看到肾小球呈

北检院部分仪器展示