实验猪HEV感染模型

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(1)模型制作  为了制作模型,我们选取了人戊型肝炎病毒US-2株,并按照剂量1.0ml/只的标准将其经静脉注射入SPF猪体内,病毒的滴度为104.5。我们在感染HEV后的第3、7、14、20、27、55天,分别从模型猪的肝、扁桃体、肠系膜、支气管、肝淋巴结、小肠、胃、胰腺、脾、唾液腺、心、肺、肾、骨骼肌等组织中取样进行病毒检测。同时,我们采集其血液进行ALT检测。在实验预定时间内,我们给模型猴进行肝穿刺活检,并经10%甲醛溶液固定标本,并进行常规组织切片和HE染色,最后用光镜下进行观察。

(2)模型特点  经过静脉注射病毒后的1周,我们的模型猪开始出现粪便排毒,这一状况一直持续到第3周。接种后第6至30天血清ALT也开始升高,并在第3至4周出现黄疸。镜检下,我们发现肝组织内有急性炎症样改变。感染HEV后第3至20日,模型动物的血清中可以检测到HEV正链RNA。即使在病毒血症消失后的第20至27天,其组织中也能检测到RNA。接种感染后的第3天,HEV病毒即能在模型猪的扁桃体、小肠、结肠、肝脏、淋巴结等组织中进行复制;接种感染1至2周以后,在肾脏和唾液腺中也能检测到病毒复制,除了肝脏外,淋巴结和肠道被证实是HEV病毒主要的复制组织。

(3)比较医学  在模型猪中,感染HEV后,肝组织活检发现有急性炎症样改变。由此,我们可以推出,HEV感染造成的肝损伤可能是由于机体对病毒的免疫反应所致,而非病毒复制,因为病毒在猪的肠道系统也能大量复制。当前,对于HEV的动物实验研究大多采用非人类灵长类动物感染模型。但由于非人灵长类动物价格昂贵,实验条件控制和其他因素的限制较多,这严重地影响和阻碍了HEV的研究进展。我们发现实验猪作为HEV的自然宿主,具有和人类较为相同的HEV感染特征。因此,本模型对于临床 HEV流行病学研究、免疫机制及疫苗的研制都有着重大的实用价值。

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