子午沙鼠HEV感染模型

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(1)变为原创的方法:

子午沙鼠是一种体重约为40g的一级动物。在制作HEV感染模型方面,我们选择了经过人工驯化的七代以上子午沙鼠作为实验动物,并在接种前三天给它们注射青、链霉素。我们采用的接种感染程序是,第一代子午沙鼠用含有HEV的戊型肝炎患者粪便的10%悬液接种。之后,我们使用HEV阳性的子午沙鼠粪便依次接种第二到第三代的子午沙鼠。在实验的预定时间内,我们采血作血清ALT、AST检测,并使用PCR方法检测模型动物粪便和血清中HEV RNA的阳性率。在模型感染观察结束后,我们过量麻醉处死动物,取其肝脏组织经过10%甲醛溶液固定,作常规组织切片,进行HE染色和电镜下观察。

(2)模型特点:

接种感染HEV后,子午沙鼠的血清ALT、AST可升高至2~6倍,且AST比ALT反应更为明显。我们使用PCR方法检测粪便和血清中HEV RNA阳性率分别为25%和37.5%。可以证明,使用HEV阳性的子午沙鼠粪便和肝组织匀浆接种同种鼠,仍然会发生HE,说明HEV阳性的子午沙鼠可以经由粪便排出病毒,并且会发生一过性的病毒血症。观察镜下病理组织学,可以发现肝组织病变表现为肝细胞的呈多种变性,局灶性肝细胞坏死、肝细胞气球样变性、溶解性坏死和门管区淋巴细胞浸润。电镜下超微结构观察肝组织细胞内线粒体结构变圆,溶酶体溶解,糖元颗粒增多,包涵体也增多。

(3)比较医学:

通过采用子午沙鼠复制的HEV感染模型,我们可以制作出一种方法简单易行、重复性好且动物死亡率低、模型成功率高的模型。子午沙鼠其自身又具有体积小、性情温和、繁殖力强、易驯服和饲养等特点。而子午沙鼠感染HEV后的潜伏期为5~8d,相比较人类HE潜伏期(人为6周左右),子午沙鼠的HEV感染潜伏期就短多了。从光镜和电镜观察结果来看,HEV感染的子午沙鼠肝组织细胞病变特征与人类轻型肝炎相似,且病变具有一定的发展过程。因此,子午沙鼠是一种较为理想的HE动物模型。

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