非人灵长类感染模型
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(1)猴子HCV人工感染的方法 在进行恒河猴、食蟹猴和熊猴HCV人工感染实验前,需要进行HAV、HBV、HCV、HDV和HEV的检测,确保检测结果为阴性。同时,还需要检查ALT酶活性是否正常。实验使用丙型肝炎患者的混合血浆,以氯胺酮麻醉条件下将混合血浆静脉滴注至实验猴(剂量为5ml/kg体重)。接种病毒后第1周开始抽血,之后每7天抽1次血样。
(2)模型特点 在接种后的第1周,模型动物ALT酶活性会明显升高,2-6周后可达到高峰,之后会反复波动。接种后2周,模型动物开始出现抗HCV IgG阳性,至10-12周时会达到高峰,血清中HCV RNA也会反复阳性。在接种7周之后,肝穿刺活检可见到光镜下的病理组织学改变。在电镜下观察到肝细胞内质网明显增生扩张,空泡内可见类病毒颗粒。免疫组化染色还显示肝细胞中有HCVNS3抗原的阳性成分。接种感染5个月后,模型动物的肝活检组织会有慢性炎性改变,超微结构观察还发现肝细胞胶元纤维组织增生。经过11个月的时间,慢性炎症情况有所减轻。模型猴除了ALT异常外,血清中还能检测到抗HCV-IgG抗体和HCV-RNA,以及肝组织显微结构和超显微结构的病理变化,意味着HCV可以人工感染实验猴。
(3)与比较医学的关系 进行HCV模型实验后,大多数的实验猴会出现短暂的消化道症状,如食欲不振等轻微症状。在接种后的2周内,恒河猴、食蟹猴和熊猴的血清ALT均会升高,类似于人类和黑猩猩感染HCV时的变化。恒河猴是我国灵长类动物资源中数量最多、分布最广的猴种之一。由于其体型适中,在实验室条件下容易繁殖,操作方便,因此是进行HCV动物模型实验的理想选择。
北检院部分仪器展示