无菌小猪感染模型
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(1)复制方法 首先需要获取3至5天大的新生无菌小猪(即gnotobiotic piglets, GnP),然后将口腔内注入10万个人轮状病毒有毒株(Wa株)的病毒颗粒。在接种后的24至72小时内,所有GnP都将表现出腹泻、明显的小肠绒毛萎缩和脱落,粪便中会有RV排出。此时,对Wa株的中和抗体将转为阳性,同时该抗体也会产生100%的保护作用,包括腹泻和排毒。
(2)模型特点 轮状病毒选择性感染和破坏模型动物的小肠绒毛,导致小肠细胞减少,从而使它们从肠腔中吸收的钠、水和营养减少,最终导致机体脱水。在接种后,GnP的肠道和血液中都会出现RV特异性抗体分泌的数量显著增加,小肠组织中的抗体分泌细胞数量也比胃肠黏膜固有层和肠系膜淋巴结中的分泌细胞数量高。实验证明,小肠组织中分泌IgA的抗体分泌细胞至少是系统性淋巴组织数量的5倍。此外,小肠中IgA的水平与机体占轮状病毒腹泻的发生密切相关。
(3)比较医学 RV感染将导致GnP发生腹泻,其发病与小肠绒毛上皮细胞中RV的出现紧密相关。RV感染的顶峰与绒毛脱落以及粪便中RV的排出量密切相关。绒毛恢复的状态与腹泻症状的好转有关。与以RV感染建立的成年小鼠和兔子模型相比,GnP作为常用的RV腹泻研究模型有许多优点。成年动物对RV感染的敏感性较低,因此以前的研究主要在低龄动物上进行。本方法复制的GnP模型可应用于RV感染宿主的部位、临床反应、病理损伤类型和疾病进展情况,以及RV毒力和宿主限制性相关基因的研究。但是,GnP模型评价各类RV疫苗的保护作用与HRV自然感染仍存在一定差异,尚不能完全解释HRV的自然感染发生机制。因此,需要通过临床试验来确定GnP腹泻模型的结论是否完全适用于HRV自然感染的情况。
北检院部分仪器展示