鼠疫菌的猴子感染模型
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鼠疫菌的猴感染模型制作详细方法:首先选择3~6kg的健康猴子,进行病原的排查。排查的内容包括HBV、SIV、猿人复古病毒和STLV(与非洲猿猴反转录病毒),以及结核。只有排查结果为阴性的猴子才能被用于实验的建立。猴子应分笼饲养在可耐高热压的不锈钢笼子中,并给予新鲜无菌的食水。此外,为了确保实验猴的福利,还应给予适当的娱乐设施。在进行外科手术后,要将实验猴在ABSL-3实验室中适应至少一周,方可进行攻毒操作。所有动物应安装T30F遥控检测仪,以持续监测体温、胸内压力、呼吸节律(RR)、心率(HR)和心电图(ECG)。实验猴在右侧股静脉安装静脉导管保证血液畅通。经过以上步骤处理后,才能对猴子进行攻毒。
在进行攻毒操作时,应先用4mg/kg的他明-嘘拉西泮进行快速麻醉。然后将猴子固定,并将鼠疫菌C092通过气溶胶发生器(MRE-3 jet, BGI, Inc., Waltham, MA, USA)吸入到实验猴的呼吸系统中。每只实验猴应吸入100±50LD50的细菌,每LD50相当于350cfu,吸入的气溶胶体积为5L。期间应记录呼吸的起落、吸入量等重要参数。所有操作应在BSL3实验室中进行,以降低感染的风险。
鼠疫菌的猴感染模型结果:感染后,每天观察猴子的身体状况。如动物的活动度、体态、鼻涕、喷嚏、咳嗽、呼吸特征、眼睛分泌物、食欲、大便、癫痫、神经症状或其他异常。同时,采集实验猴的全血,并将稀释的血样或组织匀浆液接种于胰蛋白大豆琼脂培养基中,通过计数菌落的方式,判断细菌的浓度和纯度。
评价该模型的有效性时,可以根据猴子的发热情况、菌血症、细菌量等指标来进行评估。感染初期,猴子持续发热,体温高于39℃。感染后52~80h,初次出现系统性感染的症状。后期出现呼吸急促、菌血症、细菌量逐渐上升等症状。通过胸部X线片可以发现有多个病灶肺炎,乳酸脱氢酶等指标也有所升高。病理方面表现突发纤维化脓性和出血性肺炎。以上参数均符合鼠疫的临床表现和实验结果。
综上所述:通过鼠疫菌的猴感染模型,可以有效模拟鼠疫在人体内的发病过程,并为急性传染病的研究提供了一个很好的实验模型。同时,研究人员应该将动物福利放在首位,尽可能降低实验对实验动物的危害。
北检院部分仪器展示