肠出血性大肠杆菌猪感染模型

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针对猪作为感染模型动物的研究,常使用剖宫产手术获取限菌小猪,并在微生物隔离环境里饲养,同时采用重构的牛奶作为饲料。如果小猪的健康状况良好,喂养顺利,出生后24小时即可用于实验。限菌猪模型能够成功地模拟出感染EHEC后大肠的A/E损伤和黏附位置附近微绒毛消失等症状。

(1)感染方法:采用口服大肠杆菌的方式进行感染。

(2)感染剂量:每只动物接种10ml洗涤后去除毒素的菌液,其中含活菌数4×10的9次方个,使用灌胃针灌胃给予。

(3)结果:感染后2小时便会出现腹泻症状,接着出现神经症状,如卧倒或死亡。几乎所有感染的小猪都会出现神经症状,如动作失调、共济失调、斜卧体位,甚至有些小猪出现隔夜死亡。除了腹泻症状外,血液培养结果并未发现严重的神经症状与机体整体的系统性细菌感染相关。接种了野生型E.coli的动物在肓肠和结肠表面和腺上皮都发生了A/E损伤,随感染时间的延长,损伤面积也会不断扩大。在严重受损的黏膜表面,细胞排列紊乱、杯状细胞缺失甚至消失。受累的腺上皮表面也出现了同样的症状。所有观察到神经症状的动物在组织学上都被观察到皮层内微出血病灶,但并未观察到人类感染中的肾病变现象。

通过以上模型研究已经证明,eae在A/E损伤的形成中发挥着重要作用,同时观察到产Stx2株的毒性要强于产Stx1株。然而,由于限菌猪的EHEC感染模型需要特殊的动物设施,而动物模型制备的成本也相对较高,这些限制了该模型的应用。

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