百日咳菌液致大鼠脑水肿模型

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1.造模材料  本实验使用了健康的SD大鼠作为实验动物,其中雌雄各半,体重约为200克左右。实验所需的其他材料和药物包括乌拉坦、百日咳菌液、伊文思蓝等。手术器械和注射器等器材也是必不可少的。

2.造模方法 为了让大鼠感到最小程度的疼痛和不适,我们以25%乌拉坦麻醉大鼠。在仰卧位下,我们首先分离左侧股动脉,插入内径为0.56mm的塑料管,并连接四导生理仪来监测血压和取血样。随后,在颈部正中位置切开后,我们分离左颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉。夹闭颈外动脉后,用1ml的注射器和4.5号针头,在左颈总动脉注射百日咳菌液0.2ml/kg(含菌10.8×10的9次方/ml),注射时间约为5~15秒。作为对照组,我们用同样方法注射等量的灭菌生理盐水。接着,我们将注射过百日咳菌液或生理盐水的大鼠通过舌下静脉注入3%的伊文思蓝液2ml/kg。至于空白组,则不做任何处理。

3.造模原理 通过注射百日咳菌液来诱发动物感染性脑水肿的现象,是我们在本实验中的造模原理。

4.造模后的变化 在造模后,我们发现模型组大鼠左侧半球脑组织含水量和EB含量明显高于空白组和对照组,并会随着时间的增加而增多,注菌后4时含水(82.2±0.3)%,含EB(4.4±0.4)μg/g脑组织最高。此外,在模型组中,大鼠左侧半球含水量和EB含量会比右侧高,由此可以看出向左颈总动脉注射百日咳菌液是造成左大脑半球脑水肿的主要原因。

我们还用光镜进行了观察,发现造模240分钟后,大鼠左半球脑组织明显肿胀,脑回增宽变平,脑沟变浅,脑膜紧张,血管明显充血,脑组织表面几乎全部蓝染。同时,在电镜下的观察中,我们也可以看到造模240分钟后的胶质细胞肿胀明显,有的细胞膜破裂,融合成大片水肿区域。神经元细胞皱缩,粗面内质网扩张,线粒体肿胀,细胞内有空泡样改变,毛细血管基底膜有断裂,毛细血管内皮细胞内吞饮小泡大量增加,部分聚集成葡萄状。

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