细胞水平的心律失常模型

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(1)原创方法

本研究使用SPF级大鼠进行实验。在麻醉后,我们迅速取出心脏,并将其连接到Langendorff灌流装置上。我们使用正常台氏液以8ml/min的速度进行连续灌流5分钟,以洗净心脏残血。然后,我们使用无钙台氏液进行灌流,直到心脏停止搏动。接下来,我们使用含有0.05%Ⅱ型胶原酶的无钙液进行灌流,以分离心脏单细胞。当心脏变软、色泽变浅时,我们开始取心肌组织。每隔2分钟取一次。以上操作均在37℃恒温,并充95%O2+5%CO2条件下进行。我们将不同时间取下的心室肌组织放入装有Kerb液的试管中,通过轻轻吹打的方式将其分散成单个细胞,并稳定1小时。选出形态完好的细胞进行实验研究。我们使用全细胞膜片钳技术记录单细胞电流。此外,我们还使用计算机软件控制实验过程,以分析数据。

(2)模型特点

本模型具有许多优点。首先,与其他药物筛选模型相比,本模型对不同药物的反应在人和动物中没有质的差异。其次,此模型条件单一、可控、稳定。体重和性别对观测指标的影响较小。此外,通过观察药物对不同观测指标的作用及其影响程度,我们可以直接判断抗心律失常药物的分类。最后,根据药物对动作电位时程的作用,我们可以初步预测药物可能存在的不良反应。

(3)比较医学

本方法针对抗心律失常药物进行筛选。我们选择单个心室肌细胞作为研究对象,并以电生理指标为观测指标。通过观察目前公认的几大类阳性药物对本模型中乌头碱诱发的大鼠单个心室肌细胞动作电位时程和离子电流改变的治疗作用,我们发现维拉帕米具有抑制内向钙电流的作用,因此治疗效果较好。除此之外,维拉帕米还具有缩短乌头碱诱发的动作电位时程延长的作用。这个发现与临床中已知的药物作用机理一致,具有较高的临床指导意义。

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