清醒大鼠冠状动脉结扎诱发心律失常

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(1)改良后的大鼠心肌梗死模型制备方法 体重为250~350g的雄性大鼠,用乙醚麻醉后进行颈部正中切开皮肤,并分离出气管行气管插管术接人工呼吸机进行人工呼吸。为减少呼吸道分泌物分泌,术前皮下注射阿托品0.2mg/只。接着,分离出左侧颈总动脉并插入动脉插管,连接压力换能器,并注入肝素盐水(1500U/ml),以防止管道内凝血。分离出左侧颈外静脉并插入直径为0.5~1mm的软塑料管,以供注射药物使用。之后,去除左侧胸毛,并沿第四肋间进行一长约2cm横切口,再钝性分离胸大肌和胸小肌。沿胸骨左缘第四肋间向左切开胸腔,撕开心包膜,将冠状动脉左前降支下穿0号丝线,使丝线两端分别穿过并连在一起的2个小塑料环(直径3mm),再将两端并在一起穿过一条直径为1~2mm的硬塑料管,并用套管针从后胸壁内面向外穿刺。将硬塑料管引出胸腔到背部,保留塑料管于胸腔,并使其内部对准冠脉。然后,连接电子蠕动泵持续负压吸引2小时,以便将胸腔内血液和气体吸出。在正压呼吸下迅速闭合胸腔,逐层缝合胸壁肌和皮肤,除去气管插管,停止吸入乙醚和人工呼吸。最后,缝合气管和颈部皮肤。肢体导联电极的安置是将不锈钢丝穿入8号针头钢丝前端弯曲成3mm小钩,分别刺入左下肢和右上肢外侧皮下,小钩固定在皮下组织后,退出针头,保留钢丝电极,以供记录心电之用。术后第5日,将动物放置木制的小盆内,连接电极,记录Ⅱ导联心电图,并将颈总动脉插管与压力换能器相连来记录血压。动物自然活动30分钟后结扎冠状动脉。方法是操作者左手握住穿有结扎线的塑料管,右手逐渐拉紧双股结扎线,使塑料管推动2个塑料环而压迫闭塞冠状动脉,然后固定结扎线。结扎冠状动脉后6小时处死动物,迅速取出心脏,切去心房及右心室,并放入冰箱速冻1小时。在冠状沟将心室等厚切成5片,放入0.1%硝基四氮唑蓝(N—BT)溶液中并于37℃恒温水浴振摇染色10分钟。正常心肌染为暗蓝色,梗塞区心肌则不着色而呈浅红色。观察药物对心肌梗死面积的影响,并计算出梗塞区面积占左室面积的百分比。

(2)模型特点 这种改良后的大鼠心肌梗死模型制备方法,相较于以前的方法,其模型更符合清醒状态下发生的心肌梗死。在清醒状态下,大鼠室颤发生率和死亡危险系数均较以前的方法为高。除此之外,这种方法可以观察到心律失常时动物植物神经以及交感神经的干预作用。

(3)比较医学  以前的大鼠心肌缺血性心律失常模型制备方法,通常需要在麻醉和人工呼吸条件下开胸结扎冠状动脉,虽然这种方法成功率较高,但麻醉下心血管功能及神经反射皆受到抑制,且麻醉药的种类和麻醉深度均会对心律失常产生影响。而这种改良后的大鼠心肌梗死模型制备方法可以克服上述这些缺点,并为人体发病状态时机体自身调节功能的研究提供了动物实验手段。

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