双肾双夹肾血管性高血压模型

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1.造模材料  实验动物为雄性SD大鼠,体重应在80~120g之间;用到的药物为戊巴比妥;所需器械为“Q”环形银夹,该夹子的直径为0.5mm的银丝,环的内径为0.3mm。

2.造模方法  给予动物腹腔注射3%的戊巴比妥,36~42mg/kg,麻醉10~15分钟后,通过正中的腹部纵向切口,逐层切开皮肤、肌肉到腹膜,将肾脏暴露出来,通常先处理左肾,而左肾动脉一般位于肾静脉的后上方,需要使用湿润的无棉花棒轻推肾静脉,用无齿镊子去分离动脉和静脉,至于右肾动脉就较左肾动脉容易分离,因为它在肝肾韧带之间,需要用环形银夹钳夹住肾动脉的起始位置,确认银夹在动脉上功能正常,同时检查双肾是否存在明显的瘀血、坏死或者苍白。完成操作后,需用缝合线对腹膜和肌肉进行连续缝合,皮肤则进行间断缝合。

3.造模原理  双侧肾动脉被此种银夹紧缩,导致双侧肾脏缺血,高血压主要是由双侧肾脏缺血引起肾素极跟一般情况下,血管紧张素会升高,收缩血管和释放醛固酮和内皮素等活性物质,这些因素都导致最终的高血压。

4.造模后的变化  术后1周时,血压为(17.8±2.0)kPa,术后3周时,血压(21.5±2.5)kPa,而术后10周时,血压为(27.6±3.2)kPa,因此,当血压超过20kPa时,则可判定为大鼠患有高血压症状。而在模型制作中,脑卒中症状也是需要被留意的。在术后的第1周和第3周中,实验动物没有表现出脑卒中症状,但是在第9周时,有2例出现了脑卒中症状,这些症状表现为肢体瘫痪、行动迟缓、转圈、头颈扭转,病理检查也证实其为脑基底节区出血,出血中心区内有大量红细胞。

5.注意事项  操作时需要掌握麻醉深度,过深则术后苏醒较慢、可能导致死亡,而过浅则易出血、腹脏器损伤,并且会拖延手术时间。虽然一些麻醉剂有一定的使用剂量,但由于不同批次的大鼠体质差异和麻醉剂的储存时间长短等因素,其麻醉效果也存在差异,因此,在每次大规模实验前,必须摸索合适的麻醉剂剂量。初学者制作模型时,术后出血是大鼠死亡率高的常见原因。由于肾动、静脉紧贴伴行,故钝性分离动静脉之间的筋膜时,需拔开静脉,避免其损伤,并减少避免出血,这是成功制作模型的关键。专业的操作技能可以在5分钟内完成双肾上夹。此外,操作技术娴熟可避免由于肾血管的反复牵拉引起肾脏长期缺血和瘀血,同时也可减少因操作时间过长引起的感染等不良影响,这些因素都与术后死亡相关。在术后的严格、细致的管理方面,维持饲养房的空气流通和适宜的温度非常重要,一般饲养区内的温度应保持在19~29℃之间。死亡率高也经常出现在饲养房的气压突然改变或气温突然下降的环境中,特别是在南方变化较快的气候下,当气温变冷时应使用大功率烤灯或者暖气保温,在变热时则应加强通风和使用空调制冷,以此来调整饲养区内的温度和通风等指标至适宜参数,从而减少脑卒中和死亡率的发生。


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