【操作步骤】为了制备病变组织浆，我们通过取病变组织并将其剪成小块，然后使用生理盐水洗涤至淡粉红色。接着，向该组织加入等量的生理盐水并使用高速组织捣碎机(8000～10000转/分)捣碎12分钟。然后，我们反复进行3次冻融过程，再将其置于60℃的水浴中1小时进行消毒。接下来，我们将1毫升上述组织浆加入1毫升弗氏完全佐剂(羊毛脂：石蜡油＝1：1)中，并将其加入死卡介苗75毫克中用于家兔的四肢内侧和耳根部进行皮下多点注射，每只兔子2毫升。每周注射1次，共注射4次。最后一次免疫后的第10、15、30天采集耳静脉血分离血清，并与确诊TAO(血栓闭塞性脉管炎)患者的血清进行对流电泳或双相琼脂扩散实验，出现沉淀线的动物继续饲养。同时，我们进行足背动、静脉，或胫后动、静脉的病理观察；四肢趾(指)端及溃疡肢的血管和溃疡组织的病理观察。
【结果分析】经过免疫接种2个月后，我们发现胫后动脉表现出小动脉壁增厚，管腔狭窄，内膜增生变厚或脱落而不规则；外膜透明变性，且有少量淋巴细胞浸润。进行4个月的免疫接种后，我们发现足背静脉的中段部分内膜增厚且不光滑，部分脱落；外膜有变性，淋巴细胞较少。进行6个月的免疫接种后，我们观察到足背动脉管壁中膜增厚，部分管壁出血，中性粒细胞浸润；外膜则表现出玻璃样变性，只有少数淋巴细胞浸润。经过536天的免疫接种后，实验动物的四肢趾(指)端均出现典型溃疡并坏死。我们将有典型溃疡并坏死的实验兔处死后取四肢血管及溃疡组织行病检，结果表现为动脉管壁明显增厚、变性、出血，导致管腔狭窄闭塞及新生小血管形成，血管腔结构不清。此外，溃疡坏死的皮肤及皮下组织显示鳞状上皮增生，角化过度，且皮肤及皮下炎症反应明显，大量中性粒细胞和淋巴细胞浸润，有灶性坏死及小脓肿形成，坏死区周围有血管内透明栓子形成。
