小鼠基因敲除是研究基因功能的重要手段。除此以外，还有一种经典的遗传学技术——RNA干扰，它是通过降低基因表达水平来研究基因功能的。RNA干扰机制包括RNA转录、RNA加工、RNA水平的特异性降解等，可被用于制备转基因动物模型，如基因敲低小鼠。
RNA干扰最初是在美丽线虫（C.elegans）中发现的。随后，人们发现RNA干扰在动物细胞内也起作用。RNA干扰技术具有操作简单、快速、成本低的特点，可在体内研究基因功能。基于RNA干扰的技术可以设计出RNAi表达载体，通过合成互补的正义链和反义链，与靶mRNA互补，从而实现基因敲低。由于这些载体可以稳定地整合进基因组，可在体内永久性地沉默靶基因。
RNA干扰技术的操作流程主要包括以下几个步骤：设计shRNA表达载体、转染合成的shRNA表达载体、检测基因表达的水平和表型变化。除了转染外，还可以通过受精卵原核注射等方法制备转基因小鼠，从而实现研究基因功能的目的。
RNA干扰技术的优势在于可以用于产生转基因小鼠，这使得研究者可以在一定的时空里可逆地抑制内源性基因。例如，我们可以恢复RNA干扰作用，观察基因表达恢复前后的表型变化。此外，RNA干扰技术可以在细胞系中使用，这种技术可快速评估基因功能，对于一些计量依赖型基因，通过RNA干扰技术调低基因表达足以产生表型变化，从而确定基因的功能。
基因敲低转基因动物模型的制备技术不断发展，人们开始思考如何实现基于条件性RNA干扰的基因敲低转基因小鼠。通过向shRNA启动子区插入正筛选基因，并通过特异性表达的重组酶控制RNA干扰的组织特异性，这种技术可以实现Cre、LoxP介导的条件性RNA干扰。这种技术的优势在于可控性强，可在一定的时空里控制基因的表达水平。
总之，RNA干扰技术是分析基因功能的一种重要手段，可用于制备转基因小鼠模型。尽管RNA干扰技术不能完全灭活基因，但它具有独特、快速、可靠、经济的优势，因此被广泛应用于研究基因功能。
