组织块移植模型

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移植性肿瘤模型被广泛应用于肿瘤发生和发展研究、肿瘤细胞系的建立以及高转移性肿瘤细胞株的筛选、抗肿瘤药物筛选实验等。其中,皮下移植、肾包膜下移植和原位接种是最常用的方法。

 

(一) 皮下移植法

首先,用平衡盐溶液洗涤肿瘤组织,并去除表面的血液。将组织浸泡在无菌培养皿中的无血清培养基中,然后用手术小剪刀将其剪成1-2立方毫米的小块。接下来,取一个6-8周大的裸小鼠或SCID小鼠,对其左侧或右侧颈背部进行消毒。使用手术小剪刀在肩胛骨前方的皮肤剪一小口,并顺着同侧耳朵的方向推进小剪刀,同时轻轻撑开皮下的疏松结缔组织,形成一个细小的隧道,长度约1cm。最后,使用直头的手术小镊子将肿瘤小组织块夹入隧道并轻轻压迫皮肤入口。也可以使用腰穿针将肿瘤小组织进针至皮下,再向同侧耳朵的方向推进1cm左右,并退针后轻轻压迫皮肤入口。观察接种部位约一周后,即可观察到肿瘤组织凸起生长。

 

(二) 肾包膜下移植法

同样,用平衡盐溶液洗涤肿瘤组织并去除表面血液,将其浸泡在无血清培养基中。使用手术小剪刀将其剪成1立方毫米大小的小块。取一个6-8周大的裸小鼠或SCID小鼠,对其左侧或右侧腰腹部进行消毒,用手术小剪刀在腰腹部相当于肾区位置的皮肤和腹壁剪一小口,暴露肾脏。用腰穿针吸取肿瘤小组织,然后轻轻刺破肾包膜并将肿瘤小组织注射到肾包膜下。缝合腹壁和皮肤。

 

(三) 原位接种法

根据实体瘤来源组织的不同,采取不同的组织进行接种。例如,来源于肝脏的肿瘤进行裸小鼠或SCID小鼠肝包膜下的接种;来源于肺组织的肿瘤进行裸小鼠或SCID小鼠肺包膜下的接种;来源于卵巢组织的肿瘤进行裸小鼠或SCID小鼠靠近卵巢处的卵巢系膜内或卵巢包膜下接种;来源于脑组织的肿瘤进行裸小鼠或SCID小鼠脑内的接种等。将肿瘤组织用平衡盐溶液洗涤多次,筛去表面血液,将其浸泡在无菌培养皿盛载的无血清培养基中,然后用手术小剪刀剪成1立方毫米大小的组织小块。取一个6-8周大的裸小鼠或SCID小鼠,并对相应器官的部位进行消毒。使用手术小剪刀将皮肤和腹壁或胸壁等剪一小口,暴露相应的器官。用腰穿针吸取肿瘤小组织,然后轻轻刺破相应器官的包膜并将肿瘤小组织注射到包膜下或胃壁或膀胱壁内。最后缝合腹部或胸部的皮肤。

 

如果使用的是异种的细胞或组织进行接种,需要在接种前进行抑制免疫排除反应的处理。可以使用放射线照射或者化疗药物腹腔注射进行处理。放射线照射的剂量为γ射线4.5Gy或者137Cs 2.0-4.0Gy亚致死剂量全身照射。处理后进行24小时

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