移植性肿瘤动物模型

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癌症作为一种以失控增殖的细胞群体为主要特征的疾病,在目前临床上依旧是难以对付的难题。为了更好地研究癌症的形成、发展和治疗方法,研究人员们需要建立适合的癌症模型。其中,细胞移植模型是生物医学领域中研究癌症最基础的科研手段之一。本文主要介绍非实体瘤细胞移植模型和实体瘤细胞移植模型的制作方法。

(一)非实体瘤细胞移植模型

非实体瘤细胞移植模型是在小鼠腹腔或尾静脉中接种非实体瘤细胞形成的肿瘤模型。它的制作方法比较简单,通常是将临床白血病患者的血液标本、骨髓标本或小鼠腹腔内培养传代的非实体瘤腹水标本加入平衡盐溶液中进行离心分离肿瘤细胞。如果是体外悬浮培养传代的非实体瘤细胞,则直接收获带肿瘤细胞的培养液进行离心获得肿瘤细胞。需要注意的是,如果是从临床白血病患者的血液标本和骨髓标本中收获的肿瘤细胞,通常含有红细胞,需要用红细胞溶解剂破碎红细胞。然后用平衡盐溶液洗涤离心细胞,弃除红细胞溶解剂和碎片。

以上各种来源的肿瘤细胞收获后要用无血清培养液或平衡盐溶液调成(1×1000000~1×10000000)/ ml浓度,接种小鼠或裸小鼠或SCID小鼠腹腔或尾静脉。由于不同癌症的恶性程度不同,接种的量也有所加减。而临床标本来源的及恶性程度偏低的肿瘤细胞一般接种量应该大一些。大约在接种7~10天后,你可以在小鼠的腹部或者血液中检测到肿瘤细胞的增长情况。

当你的小鼠腹腔接种成功后,你也可以抽取小鼠腹水分离肿瘤细胞,进一步作皮下接种制作实体瘤移植模型。

(二)实体瘤细胞移植模型
实体瘤细胞移植模型是利用肿瘤组织形成的肿瘤模型。制作实体瘤细胞移植模型的方法相对比较繁琐。首先,你需要使用平衡盐溶液将临床肿瘤组织或已在动物体内移植传代成功的肿瘤组织充分洗涤弃除血迹,并将周围非肿瘤组织剪除干净。然后,将其剪碎,用平衡盐溶液充分悬浮并移置离心管内,在室温下静置5分钟,弃除上层含细胞碎片的洗液,留下细小肿瘤组织沉淀。

最后,进行浸泡消化。你需要使用肿瘤组织体积5~10倍的消化液重新悬浮肿瘤组织沉淀物并吹打均匀,然后在37℃的情况下放置30分钟,期间每隔5分钟摇动一次。用等体积含血清的培养液终止消化,在室温下静置5分钟,收集上层含细胞的悬液置另一离心管。下层未完全消化的肿瘤组织小块可以进行第二次的浸泡消化。多次收集到的肿瘤细胞悬液汇总后进行离心,800~1000r/min,5分钟,弃除上层液体,留下细胞沉淀,然后用完全培养液悬浮细胞、吹打均匀和进行细胞计数,调细胞浓度为1×10000000/ml以上。最后进行动物皮下或原位接种,接种的细胞数为1000000~10000000个细胞,体积为皮下接种0.2~0.3ml,原位接种20~500μl。需要注意的是,浸泡消化所用的消化液与不同组织的肿瘤有所不同。来源于一般器官的肿瘤组织用胰蛋白酶(PBS配制),来源于神经组织或间质组织的肿瘤组织用胶原酶(用无血清培养基配制)。

以上是非实体瘤细胞移植模型和实体瘤细胞移植模型的制作方法。利用这些模型,研究人员们可以更好地模拟癌症的发展和治疗过程,以期早日找到治愈癌症的有效方式。

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