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【操作步骤】首先,我们取了空肠弯曲菌琼脂基础培养基43克,并添加了1000毫升蒸馏水。将其煮沸溶解后,在121℃下进行了15分钟的灭菌,并冷却至60℃左右。我们随后添加了脱纤维蛋白羊血清50毫升,以及10毫升的抗菌增效剂和抗生素混合液(包括抗菌增效剂5毫升、万古霉素10毫升、多黏菌素B 2500U、两性霉素2毫升和头孢菌素15毫升),并在摇匀倾注于无菌平皿中。接下来,我们将CJ-S131菌(中国疾病预防控制中心)密集接种于平皿,置于二氧化碳培养箱中进行48小时的培养。在此期间,我们用含有0.3%甲醛的生理盐水洗掉了琼脂板上培养的CJ-S131菌落,然后在4000转/分下进行了30分钟的离心。最后,我们弃掉上清液,用生理盐水将细菌悬液调整为浓度为3×10的9次方CFU/ml。

接下来,我们将细菌悬液与等量的弗氏完全佐剂混匀,完全乳化后,取50微升给小鼠注射,进行免疫。15天后,我们向小鼠注射相同浓度的菌悬液0.2毫升,对其进行加强免疫。在小鼠被致敏后的4周内,我们进行了血清抗体测量、体外抗体形成细胞(PFC)和淋巴细胞转化的测试,同时取得小鼠的肝、肠、肾等组织,进行了病理学检查,并使用ELISA法测量小鼠血清中抗ss-DNA和抗ds-DNA自身抗体的含量。

【结果分析】通过免疫小鼠1个月,我们发现小鼠血清中抗ss-DNA和抗ds-DNA抗体的水平明显增高;脾细胞以PFC值明显增高;在刀豆蛋白A刺激或无有丝分裂原作用条件下,淋巴细胞的转化率明显增强;在肝脏中,有散在的炎性细胞浸润灶。浸润细胞主要为中性粒细胞和淋巴细胞,而枯否细胞明显增生;在肾脏中,肾小球系膜细胞明显增生,肾小管上皮细胞有浊肿样变性;在肠道中,我们还发现大量的炎性细胞浸润,肠上皮细胞明显增生。总的来说,该研究对于我们研究自身免疫反应的发病机制具有非常重要的意义。


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