化学刺激法致疼痛模型

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(一)钾离子皮下透入致痛法致家兔疼痛模型

1.造模材料:家兔、饱和氯化钾溶液、直流电钾离子测痛仪。

2.造模方法:家兔使用布兜悬挂,直流电钾离子测痛仪通过皮肤透入饱和氯化钾溶液引起疼痛反应。刺激电极为一直径为1cm的圆形铜圈,内部放置饱和氯化钾液浸湿的棉球。刺激电极与皮肤接触并固定,无关电极为2.5cm x 2.5cm的薄铜片,垫以浸湿生理盐水的纱布,置于兔左侧大腿中下段处。由通电引起兔缩腿的电流mA值作为痛阈。

3.造模原理:皮下透入钾离子导致家兔疼痛反应。

4.造模后变化:通电后,家兔出现疼痛反应即缩腿反应。

(二)钾离子皮下透入致痛法致大鼠疼痛模型

1.造模材料:大鼠、饱和氯化钾溶液、K+ -4型测痛仪。

2.造模方法:使用K+ -4型测痛仪测定大鼠尾部痛阈,刺激电极固定于距离尾尖1.5cm处,与皮肤接触面积约为1cm²。无关电极用浸湿生理盐水的纱布固定于尾根部,并从通电开始记录连续鼠尾运动反应、嘶叫和强烈甩尾,记录电流值并分别称作运动阈、嘶叫阈和后痛阈。

3.造模原理:皮下透入钾离子导致大鼠疼痛反应。

4.造模后变化:通电后,大鼠出现疼痛反应即鼠尾运动反应、嘶叫和强烈甩尾,伴有连续嘶叫和全身挣扎的症状。

(三)扭体法疼痛模型

1.造模材料:小鼠、0.3%醋酸溶液、0.05%酒石酸锑钾、0.02%苯醌饱和水溶液、4%氯化钠溶液、0.02%2-苯-1,4苯甲酰苯醌(含有5%酒精水溶液)、0.00125%缓激肽、注射器。

2.造模方法:用注射器对小鼠腹腔注射上述刺激物。量分别为:0.3%醋酸溶液0.2mL/只;0.05%酒石酸锑钾0.2~0.3mL/只;0.02%苯醌饱和水溶液0.25mL/只;4%氯化钠溶液0.2mL/只;0.02%2-苯-1,4苯甲酰苯醌(含有5%酒精水溶液)0.2mL/只;0.00125%缓激肽0.2mL/只。

3.造模原理:腹腔注射化学刺激物导致小鼠疼痛反应。

4.造模后变化:注射后,小鼠出现扭体反应,如腹部凹陷(呈蜂腰状)、躯干伸张和后腿伸展、臀部高起等不适症状。

(四)缓激肽动脉注射致疼痛模型

1.造模材料:大鼠(雄性,体重250~300g)、乙醚、肝素生理盐水(肝素浓度为2500u/ml)、缓激肽生理盐水。

2.造模方法:使用乙醚对动物轻度麻醉,分离出右颈动脉并使用动脉夹阻止其血流。使用内径为0.5mm的塑料管逆行插入颈动脉,用灌有肝素生理盐水的管进行固定,并记录缓激肽生理盐水液注射前后的电流值。注射缓激肽生理盐水液(0.1~0.5μg/只)后10秒之内,出现右前肢屈曲、头部向右扭转及活动亢进反应。

3.造模原理:缓激肽动脉注射导致大鼠发生疼痛反应。

4.造模后变化:注射后,大鼠出现右前肢屈曲、头部向右扭转以及活动亢进反应,偶有尖叫反应。通常情况下,这些症状在注射缓激肽后的7~10秒内出现,持续时间为10~30秒,每5分钟注射一次,可以在6小时内重复产生相同的反应。

(五)甲醛皮下注射致疼痛模型

1.造模材料:小鼠(雌雄均可,体重18~22g)、2.5%甲醛溶液。

2.造模方法:在小鼠右后足背部注入新配制的2.5%甲醛溶液0.03mL,观察小鼠舔右后足的潜伏期及10分钟内舔右后足次数。

3.造模原理:甲醛皮下注射导致小

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