小鼠沙眼衣原体附睾炎模型

(1)复制方法  C.trachomatis MoPn Nigg Ⅱ株在 HeLa-229细胞上培养增殖后,收获感染的单层细胞。这些细胞使用超声波超声30秒,然后用4℃ 500×g离心10分钟收集上清。接着,将上清用SPG[0.2mol/L葡萄糖,20mmol/L磷酸盐(pH 7.2),5mmol/L谷氨酸]溶解。沉淀-70℃冻存备用。 将 7-8周龄的C3H/HeN(H-2k)小鼠麻醉后,在4倍解剖镜下将其腹部朝上置放,拉出阴茎包皮,将2μl含1000000IFU的CT接种物放于尿道口,使其流入尿道。接种后的前4周内,可以从膀胱培养出CT,前2周内,可以从睾丸和附睾分离出CT,至第7周时,仍可以从尿道分离出CT。

在这个实验中,可以使用C3H/HeN小鼠来制作模型。接种ID50为5×10000IFU/ml的CT,从尿道口接种ID50 20倍菌量可以引起小鼠急性和慢性附睾炎。通过此方法,制作模型不需要进行外科手术接种睾丸和附睾,可以直接从尿道口接种,这与人类自然感染途径相近,且操作简便,易于掌握。模型动物发生的症状表现与人感染此菌相似。该模型可用于研究C.trachomatis的致病机制,预防和治疗措施,并可用于研究宿主对C.trachomatis 细胞和体液免疫机制。

(3)比较医学  该模型动物感染C.trachomatis的严重程度与接种途径有关。如果通过小鼠尿道接种C.trachomatis,一周后尿道出现急性炎症,三周时表现为急性和慢性混合炎症,五周时开始表现为慢性炎症。膀胱也可能出现类似炎症反应,附睾在两周内出现急性炎症反应。而直接从输精管注射C.trachomatis则可以引起更严重的病变,如附睾肿胀,睾丸萎缩,到90天时仍可出现轻到中度的单核细胞浸润、间质纤维化和多灶性脓性肉芽肿。

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