兔金葡菌感染性结膜炎模型

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金黄色葡萄球菌在兔下睑结膜划痕处的感染会导致眼结膜感染性炎症,下面我们介绍一下制作这个模型的方法以及观测指标。

1. 模型制作方法

我们选用体重为2.2~2.5kg的新西兰白兔进行实验。在实验前1天,我们先将金黄色葡萄球菌接种于血琼脂培养基上,并在37℃培养18小时后将其稀释成3×109个/ml的菌液备用。接下来,取健康的新西兰白兔,用无菌9号针头于兔下睑结膜划十字痕(划破为宜),然后再轻拉眼睑成小杯形,用0.25ml注射器向结膜伤痕滴注0.1ml菌液。感染24小时后,我们按照每只兔眼的炎症程度分级,并随机分组进行治疗,连续给药4天,每隔24小时给兔眼进行炎症评分,并进行统计学处理。结膜炎病变评分分为0-3分,评分标准是:0分表示血管未见异常,1分表示血管充血呈鲜红色,轻微水肿,少量分泌物,2分表示血管充血呈紫红色,血管不宜辨析,明显水肿,部分眼睑外翻,分泌物使眼睑潮湿或黏着,3分表示弥漫性充血呈紫色,水肿至眼睑近闭合,分泌物使整个眼睑潮湿或黏着。

2. 观测指标与分析

(1) 症状观察:接种细菌后,动物眼睑会出现炎症反应,眼结膜会充血、水肿,分泌物增多等。

(2) 细菌培养检查:在眼睑接种细菌后的第1天、给药后的第1天及第4天进行。用无菌盐水湿棉球轻轻涂擦上下眼睑后投入5ml生理盐水中混悬均匀(待检液),吸取0.5ml待检液加入已备普通琼脂培养基平皿上,铺匀后加入37℃温箱培养18h,判断细菌培养阴、阳性。模型组在眼睑接种1天、2天、5天、8天的细菌转阴率分别约为0、33.3%、75.0%、66.7%。

(3) 结膜病理学检查:在接种细菌后第4天或第5天,处死动物,取眼结膜组织进行病理学观察。模型组动物的结膜会扩张充血、水肿。

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