偏肺病毒感染继发肺炎链球菌肺炎模型的制作

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1.研究方法:本研究使用HMPV毒株C-85473通过LLC-MK2培养,采用滴鼻感染法,在1.5×100 000 TCID50剂量下,对雌性BALB/c小鼠进行感染。感染后,进行肺炎球菌的滴鼻感染,剂量为1000 cfu。实验分为四组:单独感染HMPV组、感染灭活HMPV加肺炎球菌组、感染HMPV 5天后继发感染肺炎球菌组以及感染HMPV 14天后继发感染肺炎球菌组。每天观察动物的一般情况,包括称重及气道阻塞情况。在病毒感染后的第6天、第7天和第8天,也就是细菌感染后的第1天、第2天和第3天处死动物,测定肺组织匀浆中的病毒和细菌含量,观察病理改变并测定细胞因子的改变。

2.结果:感染HMPV后继发肺炎球菌感染会导致小鼠体重明显下降,第8天时平均下降15%,并伴有呼吸困难、竖毛、少动等症状。细菌继发感染3天后,动物100%死亡。单独感染病毒或细菌的小鼠则没有明显的临床症状和体重改变。合并感染组比单独感染组有明显的气道阻塞,但病毒滴度无明显变化。与单独细菌感染组相比,感染HMPV 5天后再感染肺炎球菌的小鼠于第8天时,细菌计数会升高。肺炎球菌单独感染组肺组织无明显病理改变,病毒单独感染组肺组织有轻度病变,且在第6至8天时随时间减轻。然而,感染HMPV 5天后再感染肺炎球菌的小鼠的肺组织病变会随时间加重,表现为明显的炎症和充血。与单独病毒感染相比,肺组织中有13种细胞因子明显增加。

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