孕大鼠子宫动脉钳夹建立胎儿窘迫模型

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(1)模型复制

在模型复制前先对妊娠20天的孕大鼠进行麻醉。接着,将大鼠仰卧固定于手术板上,对腹部手术区进行常规消毒和去毛处理。随后,沿腹中线进行正中切口,打开腹腔,并暴露子宫角。在分离出每个胎盘的分支血管后,使用无创血管夹夹住血管15分钟,然后松开血管夹,恢复血流。取出胎鼠脑组织,进行固定、石蜡包埋处理,最终进行常规组织切片和HE染色。同时,切除嗅脑和后脑,水平位切开大脑,分为前后两部分。前者通过Fura-2AM法测定脑细胞内游离Ca2+浓度,后者则通过原子吸收分光光谱法(AAS)测定脑组织总钙、总钠和总钾含量。

(2)模型特点

该模型的特点是,所有胎鼠均可出现脑膜和脑组织内血管明显扩张充血,间质水肿,大脑皮质各层次结构紊乱。此外,星形细胞水样变性、部分神经细胞胞体肿胀、胞膜界限模糊不清、胞浆疏松、尼氏小体减少或消失的情况也多见。约1/4的胎鼠还会出现部分神经细胞胞体缩小、核固缩、甚至神经细胞坏死、核碎裂溶解、脑出血等症状。此外,该模型还能复制出胎鼠脑细胞内游离Ca2+浓度超载现象。总之,该模型比较贴近人类围产期胎儿窒息的病理过程,且模型制作方法简单,成功率较高,重复性好。

(3)比较医学

缺氧缺血性脑病是娩出产科临床上围产儿神经损伤的主要原因之一,也是严重危害胎儿和新生儿健康和生命的主要疾病之一。目前对缺氧缺血性脑病(HIE)的发病机制尚未完全阐明,也没有理想的预防和治疗方法。过去的临床研究表明,机体缺氧缺血后,脑细胞可能会出现钙超载并引起一系列病理生理改变,导致机体脑神经细胞损伤和坏死。由于大鼠脑血液供应与人类相似,大鼠子宫胎盘轴的病理生理学改变也与人类相似,并且其神经系统发育的突然加速时期亦与人类吻合,因此用胎鼠制作胎儿宫内窘迫动物模型具有可行性。本模型通过钳夹进入每个胎盘的分支血管,15分钟后松开血管夹,恢复血流供应,可成功复制出官内窘迫胎鼠模型,对临床上胎儿宫内窘迫导致脑损害等方面的研究具有较好的应用价值。

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