机械扩张性IBS动物模型

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(1) 模型建立方法  在本实验中,采用动脉成形术(PTCA)球囊(3.0mm × 20mm)对8日龄Wistar大鼠进行结肠刺激(CI)。每天进行2次,每次持续1分钟,间隔30分钟,持续1周。CI中球囊压力分别为4kPa(30mmHg)(弱刺激压力)、6kPa(45mmHg)(强刺激压力)。第2周均改为8kPa(60mmHg)。对照组大鼠每日被温柔抓起,抚摸其会阴部1分钟。实验期间观察大鼠的大便和体重,并在完成上述刺激后休息2周,进行成年大鼠直结肠扩张(CRD)。

在CRD中使用医用乳胶手套手指,长4cm,用4号手术丝线与内镜逆行胰胆管造影(ERCP)导管扎紧,压力表、注射器及ERCP导管分别与三通管连接,注射器内抽入空气。进行结肠扩张前禁食12h,由肛门插入球囊6~8cm,待大鼠适应5min后分别注射空气,使球囊内压力分别达到2.7, 3.0, 5.3, 6.6, 8.0, 9.3, 10.6kPa(20, 30, 40, 50, 60, 70, 80mmHg),每个压力持续20s,重复5次。在使用双盲法记录大鼠结肠遭受刺激时的行为学评分,分别进行5次,取其均值。实验结束后处死动物,距肛门10cm处摘取降结肠,作组织病理学检查。

(2) 模型特点  本实验模型展现出了以下特点:1)伤害性刺激阈值显著下降,但4.0kPa(30mmHg)弱刺激压力的下降幅度与6.0kPa(45mmHg)强刺激压力比无显著性差异;2)直结肠扩张的耐受阈值测定结果提示,模型大鼠的初始感觉阈值、疼痛阈值、最大耐受阈值均下降,其中雌性大鼠对CRD的耐受性更差;3)模型大鼠体重无显著异常,降结肠组织结构未见明显损伤,但组织切片均有轻度的中性粒细胞浸润,且属于轻度程度。

(3) 比较医学  不断重复的结直肠腔内扩张可导致外周及中枢敏感化,并持续存在。本实验采用PTCA球囊对大鼠进行持续或反复的结直肠扩张刺激,可使其内脏敏感性增高,这种获得性的敏感性可持续至成年。结果表明,模型大鼠对于CRD的初始感觉阈值、疼痛阈值、最大耐受阈值都显著下降,与人类IBS症状相似。虽然本模型的病因与人类IBS不尽相同,但由于能较好地模拟IBS腹痛最突出的症状,且刺激可定量,微创,易于控制,重复性好,动物可保持清醒,也有可靠的生理及行为反应,所以已成为研究内脏感觉功能的一种重要方法,是目前应用最多的口己s动物模型之一。

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