葡聚糖硫酸钠诱发急、慢性渍疡性结肠炎动物模型

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(1)原创方法  饮用5%葡聚糖硫酸钠(DSS)蒸馏水溶液能够引起BALB/c小鼠的结肠炎症。实验中,将23~28g的成年雄性BALB/c小鼠自由饮用5%DSS溶液7d,然后饮用不含DSS的蒸馏水14d,期间每日观察动物的大便性状和隐血情况,测量体重并按照DAI标准进行评分。在连续饮用5%DSS 7d,或其后停药14d时,颈椎脱臼法处死小鼠后进行解剖。从肛门至回盲部的结肠中,取远端结肠、横结肠和升结肠各l块组织标本(2mm×10mm),另于有严重炎症或溃疡处至少取1块组织标本,进行常规石蜡包埋、切片(4mm)、HE染色,观察组织学损伤程度,并予以评分。疾病活动指数(DAI)评分标准根据体重、大便性状、隐血或血便,分为0-4分;组织学损伤程度用炎症、病变深度、隐窝破坏与病变范围评分。该方法简便易行,适用于研究结肠炎发病机制和药物筛选。

(2)模型特点  饮用5%DSS溶液能够引起BALB/c小鼠结肠炎症有其独特的模型特点。在连续饮用5%DSS 7d,或其后停药14d时,动物表现出症状和病理生理改变。第4日开始出现懒动、体毛凌乱,大便松散,隐血阳性等症状;DAI值随着饮用DSS时间的延长而升高,第7日时DAI平均值为10.2。解剖后结肠标本肉眼观察呈现充血、水肿,光镜下可见全结肠多灶性小溃疡,并且全部隐窝被破坏,炎症主要累及黏膜和黏膜下层,伴有少量淋巴、单核细胞和中性粒细胞。病变以远端结肠、横结肠和升结肠为重,但停止饮用5%DSS溶液14d后,动物表现得到改善。可以看到,解剖后结肠标本肉眼观察未见明显溃疡、糜烂,光镜下可见隐窝部分或全部被破坏,但灶性小溃疡比急性期局限,边缘伴上皮再生、修复和腺体增生,炎症主要累及黏膜和黏膜下层,偶可至肌层,浸润的炎症细胞以淋巴、单核细胞为主,部分伴有少许中性粒细胞。此期以淋巴、单核细胞为主的慢性炎症细胞浸润与急性炎症不同。

(3)比较医学  与人类结肠炎相似,饮用5%DSS溶液所引起的BALB/c小鼠结肠炎症也显示出特定的病理生理特征。在饮用DsS水溶液的过程中,肠黏膜屏障功能被破坏,肠腔内抗原进入黏膜和黏膜下层,引起继发性炎症反应。这与人类结肠炎的发病机制有相似之处。实验证实,甲硝唑和环丙沙星能够对DSS结肠炎小鼠的急性期病变有效,而环孢霉素则对DSS慢性结肠炎有明显疗效。因此,肠道菌群的失衡或失调可能与DSS小鼠急性期炎症有关,而T细胞介导的免疫紊乱则可能与慢性期肠道病损相关。DSS诱发BALB/c小鼠结肠炎症的机制仍待进一步研究,但该模型具有简便易行、成功率高和重现性好等优点,已成为研究结肠炎

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