(1) 复制方法

为了建立人型结核分枝杆菌的动物模型，我们在改良的罗氏培养基上培养了2-3周，然后取出生长良好的细菌，用玛瑙乳钵研磨成5mg/ml的均匀菌悬液（包含0.05％吐温80的灭菌生理盐水溶液）。我们将每只小鼠的尾静脉注射0.2毫升（约10000000CFU）的悬液。在模型动物感染观察的过程中，我们定期细菌涂片分离和培养，同时还处死动物，取出其组织器官。我们使用10％甲醛溶液对组织进行固定，作常规组织切片和HE染色，并在光镜下观察。

(2) 模型特点

通过对我们建立的动物模型进行脏器涂片镜检和培养，我们发现心肌、心包膜、主动脉干、冠状动脉、肝、脾、肺、肾和淋巴结等部位均可存在结核菌。在镜下病理学检查中，我们发现心包膜以淋巴细胞和单核细胞浸润为主的炎性反应；心肌以部分肌纤维短裂、溶解、淋巴细胞和单核细胞聚集为主；主动脉干的内壁不规则，伴有较多淋巴细胞和单核细胞聚集的炎性反应。肝、脾和肾等器官可出现坏死，而脑则表现出淋巴细胞浸润的炎性反应。使用BCG免疫组化染色，我们发现模型动物的脏器可以检测出BCG的阳性反应。在电镜下观察，我们还注意到线粒体明显肿胀、排列紊乱，肌纤维溶解，并且可以看到基膜。我们还对不同品系的小鼠进行了结核菌感染实验，发现NIH和BALB / c小鼠对结核菌不敏感，TA1和615的小鼠之间存在着明显的性别差异；而TA2和DBA / 2小鼠虽然对结核菌比较敏感，但和C57BL / 6N和KM小鼠相比，每克脏器内的结核菌含量显著降低。

(3) 比较医学

在人类感染结核杆菌后，只有一小部分人可引起急性疾病过程，大部分人能形成有效的免疫应答，阻止疾病的进展，这些人都成为了无临床症状的潜伏感染状态，这种状态可以持续数年，甚至数十年。当机体免疫力下降或应用糖皮质激素时，这种潜伏感染就容易被激活形成活动性疾病。最初，通过感染小量结核杆菌的方法建立了潜伏感染模型。后来，我们换用了对感染细菌后进行抗结核药物治疗的方法来建立模型。建立该模型涉及许多参数，如感染菌量、感染途径、抗结核药物治疗的开始时间、药物剂量、治疗时间和停药时间以及抗结核药物治疗终止到免疫干预的时间间隔等。目前，该模型仍不能完全反映出人体结核病的所有临床特征，但是它仍然是研究结核杆菌潜伏感染的重要工具，在一定程度上能够模拟人体疾病的发展过程，并为研究潜伏感染状态下结核杆菌的生理特性、免疫学机制以及解释潜伏感染的发生提供病原学方面的材料。同时，该模型也为新药筛选和疫苗筛选、治疗MTB潜伏感染提供了依据。

北检院部分仪器展示